残留DNA样品制备试剂盒从中提取宿主细胞DNA细胞系中产生的产物,如CHO,大肠杆菌,人类,Vero,毕赤酵母,NS0和MDCK。该试剂盒使用化学裂解和磁珠有效提取基因组来自不同样品类型的DNA,包括含有高蛋白和低蛋白的样品DNA浓度。
适合提取<100bp的DNA碎片
悬浮分散性佳的磁珠增加接触DNA的几率,从而更好地提取目的DNA
非特异性RNA的加入减少目的基因的非特异性损失
配套恒温涡旋振荡器可取得更加的DNA提取效果
优质的蛋白酶K提供优良的蛋白裂解效果
高纯度的DNA样品利于后期的qPCR检测
采用去蛋白抑制剂的步骤,利于高浓度蛋白样品的qPCR
细胞表达的生物制品, 包括单抗药物、细胞治疗和疫苗, 新药申报需要对宿主表达细胞的残留DNA进行定量。 这类的生物制品痕量DNA通常在pg级水平, 而行业规范回收率达到70-130%才算合格,市场上大部分的DNA提取试剂都不合格,只有几家试剂供应商合格。 问题的难点在于1)如何增加DNA提取的效率?2)如何解决高浓度蛋白的PCR扩增干扰?3)如何尽可能去除PCR抑制剂(除蛋白外)?4)如何解决乙醇干燥带来的实验间操作误差?本DNA提取方法通过在经典DNA提取方法上改进了三个步骤:1)蛋白促溶步骤;2)旋转混匀;3)去除PCR抑制剂步骤。从而解决了上述的4个问题。
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